Rak jamy nosowo-gardłowej

W swoich badaniach nad wykonalnością diagnozowania raka nosogardzieli poprzez wykrywanie wirusa Epsteina-Barra (EBV) w tkankach za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), Feinmesser i in. (2 wydanie) nie wykrył wykrywalnego DNA EBV w normalnych limfocytach migdałków, leukocytach od seropozytywnych dawców krwi EBV lub wolnych od choroby węzłach chłonnych od pacjentów z innymi nowotworami głowy i szyi. Ponieważ częstość występowania zarówno raka nosogardzieli, jak i zakażenia EBV w Hongkongu (geograficznie stanowiącym część południowych Chin) jest wysoka, również używaliśmy PCR do poszukiwania DNA EBV w tkankach z różnych miejsc w regionie głowy i szyi.
DNA EBV amplifikowano za pomocą PCR przez 40 cykli z 500 ng DNA z każdej próbki, w warunkach identycznych z tymi opisanymi poprzednio2. Startery oligonukleotydowe stosowane do amplifikacji DNA EBV znajdowały się w obrębie pierwszego-wewnętrznego fragmentu powtórzenia (IR1) EBV DNA, od zasady 1399 do zasady 1520. Zamplifikowane produkty analizowano za pomocą elektroforezy żelowej z 4% agarozą, a następnie barwienia bromkiem etydyny. Specyficzność zamplifikowanych produktów potwierdzono przez hybrydyzację Southerna żelu, a następnie sondowanie membrany sondą reporterową znakowaną 32P. Sonda reporterowa oligonukleotydu obejmuje region wewnątrz pierwszego wewnętrznego fragmentu z powtórzeniami z zasady 1424 do zasady 1439. DNA (5 ng) wyekstrahowany z linii komórkowej Raji zastosowano jako kontrolę pozytywną. W naszym badaniu DNA EBV było wykrywalne za pomocą PCR w 10 z 20 próbek do wycięcia migdałków. Gdy zastosowano podobne metody w celu zbadania próbek z autopsji od pacjentów bez objawów choroby górnych dróg oddechowych lub stanu niedoboru odporności, wirusowe DNA znaleziono również w 8 na 10 migdałków, 8 na 20 podśluzowatych gruczołów ślinowych, 7 na 15 ślinianek przyusznych. gruczołów, 5 z 6 próbek krtani, 8 z 10 próbek nosogardła i 7 z 10 węzłów chłonnych szyjnych.
Wyniki te pokazują, że swoistość wykrywania EBV przez PCR w diagnozie raka nosogardzieli może być utrudniona przez jego wysoką szybkość wykrywania w różnych miejscach w regionie głowy i szyi w normalnej populacji.
G. Srivastava, Ph.D.
ACL Chan, MB, BS
FCS Ho, MD, FRCPath.
SL Loke, MRCPath.
S. Pittaluga, MD
University of Hong Kong, Queen Mary Hospital Compound, Hongkong
2 Referencje1. Feinmesser R, Miyazaki I, Cheung R, Freeman JL, Noyek AM, Doscn HM. . Rozpoznanie raka nosogardzieli przez amplifikację DNA tkanki uzyskanej metodą aspiracji cienkoigłowej. N Engl J Med 1992; 326: 17-21.
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
2. Dickens P, Srivastava G, Loke SL, Chan CW, Liu YT. . Wirus Epstein-Barr DNA w dobrze zróżnicowanym raku nosogardzieli u chińskich pacjentów w Hong Kongu. J Clin Pathol (w druku).
Google Scholar
Feinmesser i in. nie określił histologicznych cech guzów głowy i szyi, które nie były rakami nosowo-gardłowymi; takie nowotwory zostały zgłoszone przez innych1, aby w niektórych przypadkach były pozytywne wobec EBV (guzy nabłonkowe migdałków, grasicy, ślinianki przyusznej i części gardła). Autorzy nie określili również stopnia zróżnicowania w sześciu badanych rakach nosogardzieli Ponieważ dobrze zróżnicowane nowotwory (klasa I Światowej Organizacji Zdrowia [WHO]) zawierają o wiele mniej odpowiedników genomu EBV niż bardziej niezróżnicowane formy (II i III stopień WHO), 2 można się spodziewać różnych intensywności sygnału autoradiograficznego dla jądrowego Epsteina-Barra antygeny (EBNA-1) i 2 (pomimo jednakowych sygnałów .-aktyny) u pacjentów z dobrze zróżnicowanym i słabo zróżnicowanym rakiem nosogardzieli. Ponieważ wyniki autoradiografii dla .-aktyny nie są pokazane na ryc. 4 artykułu, nie można wyciągnąć wniosków na temat ekwiwalentów genomu …
Autorzy nie wykazali genomów EBV w tkance migdałków od żadnej z 46 zdrowych osób. Jest to zaskakujące, ponieważ migdałki zawierają komórki nabłonkowe, które są podatne na zakażenie EBV. Poprzednie badanie, w którym również zastosowano technikę PCR, wykazało, że 35 ze 157 zdrowych osób dorosłych (22 procent) straciło EBV z jamy ustnej i gardła.3 Spośród nich 41 procent rzuciło wirusa typu B, 50 procent straciło typ A, a 9 procent straciło życie. oba szczepy.
Konieczne są bardziej szczegółowe badania, aby określić swoistość i wartość predykcyjną tej metody w diagnostyce raka nosogardzieli.
Volker Schuster, MD
Hans Wolfgang Kreth, MD
University of Würzburg, D-8700 Würzburg, Niemcy
3 Referencje1. Huang DP, Chan KM, Tsao Sy, et al. Guzy głowy i szyi związane z EBV i zmiany grasicy. W: Ablashi DV, Faggioni A, Krüger GR, Pagano JS, Pearson GR, wyd. Epstein-Barr virus and human disease 1988. Clifton, NJ: Humana Press, 1989: 277-80.
Google Scholar
2. Raab-Traub N, Flynn K., Pearson G, i in. . Zróżnicowana postać raka nosogardzieli zawiera DNA wirusa Epsteina-Barr. Int J Cancer 1987; 39: 25-9.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
3. Sixbey JW, Shirley P, Chesney PJ, Buntin DM, Resnick L.. Wykrywanie drugiego rozpowszechnionego szczepu wirusa Epstein-Barr. Lancet 1989; 2: 761-5.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
Autorzy odpowiadają:
Do redakcji: Dr Srivastava i wsp. Znaleźli genomowy materiał EBV w około połowie tkanek od pacjentów w południowych Chinach.1 My i inni 2, 3 również odkryliśmy genom EBV w ślinie i tkance ślinianki; jednak nasze badanie próbek od pacjentów z Kanady wykazało, że EBV nie był wykrywalny w tkance migdałowej, węzłach szyjnych lub krwi od dużej liczby dawców EBV-seropozytywnych.4 Wśród tych tkanek tylko u osób z rakiem jamy nosowo-gardłowej i przerzutami do węzłów chłonnych zawierał genomy EBV.4 Obserwacje Srivastava i in. są intrygujące. Wysoka częstość występowania wirusa w południowych Chinach sugeruje, że naturalna historia zakażenia EBV jest różna, prawdopodobnie powiązana z środowiskowymi kofaktorami podejrzewanymi o powodowanie wysokiej częstości występowania raka nosogardzieli w tym regionie.5
Powtarzalne sekwencje podobne do EBV występują w określonych miejscach prawidłowego ludzkiego genomu. 6 Interesujące byłoby potwierdzenie wysokiego występowania wirusa EBV w węzłach chłonnych głowy i szyi od pacjentów w południowych Chinach za pomocą dodatkowych systemów amplifikacji. Takie potwierdzenie, a także środki ostrożności przeciwko przypadkowemu zakażeniu krzyżowemu DNA dodatnim względem EBV sugerowali już wcześniej badacze, którzy stosowali ten sam system amplifikacji co Srivastava i wsp. (i którzy nie znaleźli EBV w normalnej tkance węzłów chłonnych od pacjentów w Kalifornii) .3 Ten system amplifikacji wykorzystuje kombinację primer-sonda pochodząca z powtarzalnego regionu BamHI W w genomie EBV. Użyliśmy sondy genomowej z tego samego regionu i okazjonalnie uzyskaliśmy fałszywą hybrydyzację z ludzkim DNA, który w inny sposób był wolny od wirus
[więcej w: nfz łódź przeglądarka skierowań, teb edukacja leszno, cezas lublin ]