Krótki raport: Chlamydia Psittaci Zapalenie wsierdzia zdiagnozowane przez kulturę krwi czesc 4

Ponadto ml podwielokrotności skroplonej, klarownej próbki krwi zatężono przez filtrację na powierzchni 0,2-.m filtra poliwęglanowego (o średnicy około 13 mm) i zbadano pod kątem obecności cząstek chlamydii za pomocą mikroskopii bezpośredniego immunofluorescencji z komercyjnym przeciwciałem. przeciw chlamydialnemu lipopolisacharydzie (Ortho Diagnostics Systems, Raritan, NJ) .2
Wykrywanie antygenu chlamydii w zniekształconych sekcjach zastawki mitralnej
Sześciomikronowe skrawki tkanki zastawki mitralnej i tętniak podkolanowo-tętniczy poddano deparafinizacji i barwieniu w celu uzyskania bezpośredniej immunofluorescencyjnej mikroskopii z komercyjnym przeciwciałem skierowanym przeciw chlamydiowemu lipopolisacharydom, jak opisano powyżej. Skrawki zastawki mitralnej i tętnicy również wybarwiono w celu bezpośredniej immunofluorescencji za pomocą mysiego przeciwciała monoklonalnego, o którym wiadomo, że reaguje na C. pneumoniae, ale nie reaguje krzyżowo z C. psittaci. Jako kontrolę, skrawki zastawki mitralnej uzyskane od pacjenta z udokumentowanym bakteryjnym zapaleniem wsierdzia wywołanym przez gatunki paciorkowców poddano deparafinizacji i wybarwiono w celu bezpośredniej immunofluorescencji za pomocą komercyjnego przeciwciała skierowanego przeciw chlamydiowemu lipopolisacharydowi.
Wyniki
Figura 1. Figura 1. Monowarstwy komórek L929 18 do 24 godzin po zaszczepieniu próbkami wycierającymi do gardła barwionymi przeciwciałem poliklonalnym C. psittaci skierowanym przeciwko elementarnym jednostkom (panel A), C. pneumoniae mysiemu monoklonalnemu przeciwciału (panel B) i C trachomatis Commercial Monoclonal Antibody (Panel C) (x 390). Groty strzałek w panelu A oznaczają inkluzyjne chlamydiowe znakowane izotiocyjanianem.
Chlamydiowe ciałka inkluzyjne były widoczne w pojedynczej warstwie L929 zaszczepionej próbką gardła i barwione króliczym przeciwciałem poliklonalnym przeciw C. psittaci (Fig. 1A). Hodowle z materiału gardłowego nie reagowały z przeciwciałem monoklonalnym specyficznym dla C. pneumoniae (ryc. 1B) lub C. trachomatis (ryc. 1C). Ponieważ próbka krwi była toksyczna dla komórek L929, można było znaleźć tylko kilka wtrętów, ale te nieliczne były wystarczające do stwierdzenia, że żywe chlamydie są również obecne we krwi. Ponadto badanie mikroskopowe barwionej próbki krwi skoncentrowanej na filtrze ujawniło liczne cząsteczki chlamydii.
Ryc. 2. Ryc. 2. Przekrój zastawki mitralnej z wewnątrzkomórkowym ciałem inkluzyjnym (groty strzałek) (Giemsa Stain, × 605). Rycina 3. Rycina 3. Histopatologiczny przekrój roślinności zastawki mitralnej przedstawiający fluorescencyjny antygen chlamydii (panel A, x 95, panel B, x 365). Sekcja mitralna z wybarwionym Giemsa wykazała obecność wewnątrzkomórkowych ciałek inkluzyjnych (ryc. 2) zgodnych z chlamydiami. Ponadto, liczne fluorescencyjne struktury charakterystyczne dla chlamydiowych ciał inkluzyjnych wykryto w tętnicy podkolanowej (nie pokazano) i sekcjach mitralnych (fig. 3) i nie wykryto ich w sekcjach mitralnych od pacjenta, który służył jako kontrola negatywna. (nie pokazany). Tkanka zastawki mitralnej od pacjenta nie reagowała z przeciwciałem specyficznym dla C. pneumoniae (nie pokazano). Tkanka zastawki mitralnej od pacjenta z bakteryjnym zapaleniem wsierdzia powodowanym przez gatunki paciorkowców nie reagowała z przeciwciałem przeciw amyloidozie (nie pokazano).
Próbki surowicy pobrane 28 października i 18 listopada 1989 r. I przeanalizowane przez Departament Zdrowia Stanu Karolina Północna miały miana wiązania dopełniacza dla chlamydii 1:32.
Dyskusja
W niniejszym raporcie opisano pacjenta z zapaleniem wsierdzia z powodu C
[więcej w: epirubicyna, szpinakowa wróżka, ttw katowice ]